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偏光顯微鏡的技術(shù)原理

更新時(shí)間:2017-09-26   點(diǎn)擊次數(shù):1168次
 
 
 ?。ㄒ唬﹩握凵湫耘c雙折射性:光線通過某一物質(zhì)時(shí),如光的性質(zhì)和進(jìn)路不因照射方向而改變,這種物質(zhì)在光學(xué)上就具有“各向同性”,又稱單折射體,如普通氣體、液體以及非結(jié)晶性固體;若光線通過另一物質(zhì)時(shí),光的速度、折射率、吸收性和偏振、振幅等因照射方向而有不同,這種物質(zhì)在光學(xué)上則具有“各向異性”,又稱雙折射體,如晶體、纖維等。
 
 ?。ǘ┕獾钠瘳F(xiàn)象:光波根據(jù)振動(dòng)的特點(diǎn),可分為自然光與偏振光。自然光的振動(dòng)特點(diǎn)是在垂直光波傳導(dǎo)軸上具有許多振動(dòng)面,各平面上振動(dòng)的振幅分布相同;自然光經(jīng)過反射、折射、雙折射及吸收等作用,可得到只在一個(gè)方向上振動(dòng)的光波,這種光波則稱為“偏光”或“偏振光”。
 
 ?。ㄈ┢獾漠a(chǎn)生及其作用:偏光顯微鏡zui重要的部件是偏光裝置——起偏器和檢偏器。過去兩者均為尼科爾(Nicola)棱鏡組成,它是由天然的方解石制作而成,但由于受到晶體體積較大的限制,難以取得較大面積的偏振,偏光顯微鏡則采用人造偏振鏡來代替尼科爾梭鏡。人造偏振鏡是以硫酸喹啉又名Herapathite的晶體制作而成,呈綠橄欖色。當(dāng)普通光通過它后,就能獲得只在一直線上振動(dòng)的直線偏振光。偏光顯微鏡有兩個(gè)偏振鏡,一個(gè)裝置在光源與被檢物體之間的叫“起偏鏡”;另一個(gè)裝置在物鏡與目鏡之間的叫“檢偏鏡”,有手柄伸手鏡筒或中間附件外方以便操作,其上有旋轉(zhuǎn)角的刻度。從光源射出的光線通過兩個(gè)偏振鏡時(shí),如果起偏鏡與檢偏鏡的振動(dòng)方向互相平行,即處于“平行檢偏位”的情況下,則視場zui為明亮。反之,若兩者互相垂直,即處于“正交校偏位”的情況下,則視場*黑暗,如果兩者傾斜,則視場表明出中等程度的亮度。由此可知,起偏鏡所形成的直線偏振光,如其振動(dòng)方向與檢偏鏡的振動(dòng)方向平行,則能*通過;如果偏斜,則只以通過一部分;如若垂直,則*不能通過。因此,在采用偏光顯微鏡檢時(shí),原則上要使起偏鏡與檢偏鏡處于正交檢偏位的狀態(tài)下進(jìn)行。
 
  (四)正交檢偏位下的雙折射體:在正交的情況下,視場是黑暗的,如果被檢物體在光學(xué)上表現(xiàn)為各向同性(單折射體),無論怎樣旋轉(zhuǎn)載物臺(tái),視場仍為黑暗,這是因?yàn)槠鹌R所形成的線偏振光的振動(dòng)方向不發(fā)生變化,仍然與檢偏鏡的振動(dòng)方向互相垂直的緣故。若被檢物體具有雙折射特性或含有具雙折射特性的物質(zhì),則具雙折射特性的地方視場變亮,這是因?yàn)閺钠鹌R射出的直線偏振光進(jìn)入雙折射體后,產(chǎn)生振動(dòng)方向不同的兩種直線偏振光,當(dāng)這兩種光通過檢偏鏡時(shí),由于另一束光并不與檢偏鏡偏振方向正交,可透過檢偏鏡,就能使人眼看到明亮的象。光線通過雙折射體時(shí),所形成兩種偏振光的振動(dòng)方向,依物體的種類而有不同。
 
  雙折射體在正交情況下,旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)時(shí),雙折射體的象在360°的旋轉(zhuǎn)中有四次明暗變化,每隔90°變暗一次。變暗的位置是雙折射體的兩個(gè)振動(dòng)方向與兩個(gè)偏振鏡的振動(dòng)方向相一致的位置,稱為“消光位置”從消光位置旋轉(zhuǎn)45°,被檢物體變?yōu)閦ui亮,這就是“對(duì)角位置”,這是因?yàn)槠x45°時(shí),偏振光到達(dá)該物體時(shí),分解出部分光線可以通過檢偏鏡,故而明亮。根據(jù)上述基本原理,利用偏光顯微術(shù)就可能判斷各向同性(單折射體)和各向異性(雙折射體)物質(zhì)。
 
 ?。ㄎ澹└缮嫔涸谡粰z偏位情況下,用各種不同波長的混合光線為光源觀察雙折射體,在旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)時(shí),視場中不僅出現(xiàn)zui亮的對(duì)角位置,而且還會(huì)看到顏色。出現(xiàn)顏色的原因,主要是由干涉色而造成(當(dāng)然也可能被檢物體本身并非無色透明)。干涉色的分布特點(diǎn)決定于雙折射體的種類和它的厚度,是由于相應(yīng)推遲對(duì)不同顏色光的波長的依賴關(guān)系,如果被檢物體的某個(gè)區(qū)域的推遲和另一區(qū)域的推遲不同,則透過檢偏鏡光的顏色也就不同。
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